Germline variant burden in multidrug resistance transporters is a therapy-specific predictor of survival in breast cancer patients

Multidrug resistance due to facilitated drug efflux mediated by ATP-binding cassette (ABC) transporters is a main cause for failure of cancer therapy. Genetic polymorphisms in ABC genes affect the disposition of chemotherapeutics and constitute important biomarkers for therapeutic response and toxicity. Here we correlated germline variability in ABC transporters with disease-specific survival (DSS) in 960 breast cancer (BRCA), 314 clear cell renal cell carcinoma and 325 hepatocellular carcinoma patients. We find that variant burden in ABCC1 is a strong predictor of DSS in BRCA patients, whereas candidate polymorphisms are not associated with DSS. This association is highly drug-specific for subgroups treated with the MRP1 substrates cyclophosphamide (log-rank p = 0.0011) and doxorubicin (log-rank p = 0.0088) independent of age and tumor stage, whereas no association was found in individuals treated with tamoxifen (log-rank p = 0.13). Structural mapping of significant variants revealed multiple variants at residues involved in protein stability, cofactor stabilization or substrate binding. Our results demonstrate that BRCA patients with high variant burden in ABCC1 are less prone to respond appropriately to pharmacological therapy with MRP1 substrates, thus incentivizing the consideration of genomic germline data for precision cancer medicine.     

PERK信号通路介导结肠癌细胞对5-氟尿嘧啶耐药机制的研究

目的:观察PERK蛋白对结肠癌细胞药物敏感性的影响，并进一步探讨其相关作用机制。方法:结肠癌细胞系HCT116分为三组:空白对照（Control）组、下调PERK表达（si-PERK）组、阴性对照（si-NC）组；采用免疫荧光及RT-PCR验证转染效率；利用CCK-8实验检测下调PERK表达后结肠癌细胞对化疗药物5-FU的敏感性变化；Annexin V-FITC凋亡实验检测下调PERK表达对结肠癌细胞凋亡的影响；利用RT-PCR及Western Blot实验检测PERK信号通路中关键分子eIF2α、ATF4、CHOP、XIAP的mRNA及蛋白表达变化。结果:RT-PCR实验表明:与正常对照组相比，si-PERK 组mRNA的表达显著下降（P＜0.05）,免疫荧光提示转染效率达80%以上；CCK-8实验发现与si-NC组相比，5-FU对 si-PERK组细胞的半数抑制浓度（IC50）明显降低（P＜0.01）；Annexin V-FITC凋亡实验发现与si-NC组相比，si-PERK组细胞的凋亡发生率显著升高（P＜0.05）；RT-PCR及Western Blot实验发现与si-NC组相比，si-PERK组细胞中PERK信号通路下游关键分子eIF2α、ATF4、CHOP的mRNA及蛋白表达均明显降低（P＜0.05）。结论:在结肠癌细胞中，抑制PERK表达后，其可能通过下调eIF2α、ATF4、CHOP的表达促进细胞发生凋亡，从而促进细胞对化疗药物5-FU的敏感性。     

抗阻训练联合家居康复护理在发育性髋关节不良中的应用

目的探究与分析Thera-Band渐进抗阻训练联合家居康复护理对发育性髋关节不良术后患儿髋关节功能的促进效果。方法选取医院自2016年12月—2018年12月收治的发育性髋关节不良手术患儿68例作为研究对象,采用随机数字表法分为对照组与观察组,每组各34例,两组均给予常规护理,对照组给予Thera-Band渐进抗阻训练,观察组在对照组基础上给予家居康复护理,对比两组患儿术后不同时间点Harris评分以及患儿家属发育性髋关节不良的健康教育知晓情况。结果两组患儿出院后1个月、出院后3个月的Harris评分明显高于出院时,观察组较对照组相比Harris评分改善更加显著,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组与对照组相比家属发育性髋关节不良情况健康教育知晓评分较高,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论Thera-Band渐进抗阻训练联合家居康复护理进一步的提高了患儿髋关节功能功能,也在护理工作中促进提高了患儿家属对发育性髋关节不良的健康教育知晓情况,更好的发挥了辅助效果。     

MicroRNA-145增强非小细胞肺癌细胞对吉非替尼敏感性及其机制探讨

目的:探讨微小RNA-145（microRNA-145，miR-145）对非小细胞肺癌细胞系吉非替尼耐药的作用及其可能的潜在机制。方法:实时荧光定量PCR（Q-PCR）方法检测正常细胞及非小细胞肺癌细胞中miR-145的表达差异；不同时间5 μmol/L吉非替尼干预肺癌细胞SPC-A-1和A549后，Q-PCR检测miR-145表达变化；miR-145 mimics和miR-145 inhibitors分别转染SPC-A-1和A549肺癌细胞后，CCK8检测细胞活力变化;双荧光素酶报告系统检测miR-145与ADAM19的靶向结合；miR-145 mimics转染SPC-A-1和A549肺癌细胞，Western blot检测ADAM19蛋白表达；Western blot检测5 μmol/L吉非替尼干预后，SPC-A-1和A549肺癌细胞中ADAM19蛋白的表达；miR-145 mimics转染SPC-A-1和A549肺癌细胞，再用5 μmol/L吉非替尼干预，Western blot检测ADAM19蛋白的表达；采用siRNA抑制ADAM19表达，再用5 μmol/L吉非替尼干预，CCK8检测细胞活力；采用BALB/C雌性裸鼠皮下接种肿瘤细胞的方法，观察上述效应。结果:Q-PCR结果显示，与正常肺上皮细胞系BEAS-2B相比较，肺癌细胞SPC-A-1和A549中miR-145表达明显降低；5 μmol/L吉非替尼干预SPC-A-1和A549细胞后，miR-145表达显著上调；转染miR-145 mimics后,CCK8结果显示两种细胞细胞活力下降；双荧光素酶报告系统结果显示，miR-145靶向结合ADAM19基因的3'-UTR区；Western blot结果显示，5 μmol/L吉非替尼诱导SPC-A-1和 A549细胞后，两种细胞中ADAM19蛋白表达均降低；miR-145 mimics转染SPC-A-1和A549细胞，之后给予5 μmol/L吉非替尼治疗，ADAM19蛋白表达下调；siRNA抑制SPC-A-1和A549细胞中ADAM19表达，再给予5 μmol/L吉非替尼治疗，CCK8结果显示，两种细胞的细胞活力显著降低；过表达BALB/C雌性裸鼠的miR-145后，显著抑制皮下肿瘤生长，并且增强吉非替尼的抗肿瘤效果。结论:miR-145显著增强肺癌细胞SPC-A-1和A549对吉非替尼的敏感性，其机制可能是通过靶向结合AMDM19基因的3'-UTR区域，从而抑制其表达。miR-145有可能成为治疗非小细胞肺癌吉非替尼耐药的有效靶点。